詳細(xì)介紹
以下是 核酸釋放劑的詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱: 核酸釋放劑
規(guī)格:10mL
編號(hào):GOY-P4035
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡(jiǎn)單,,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,,特異性強(qiáng),。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果,。
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組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5,、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
使用方法:
一,、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照,。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,,6,5,4,,3,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照),??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
SAA4 ELISA Kit馬HSP90AA1 elisa檢測(cè)試劑盒Secodihydro-hydramicromelin B
SAA3 ELISA Kit馬IDO1 elisa檢測(cè)試劑盒p-Coumaryl alcohol
SAA ELISA Kit馬IgE elisa檢測(cè)試劑盒Cuspidiol
SDPR ELISA Kit馬IgG elisa檢測(cè)試劑盒p-Hydroxyphenethyl trans-ferulate
serum/glucocorticoid regulated kinase 2,SGK2 ISA KIT馬IL-1β elisa檢測(cè)試劑盒γ-Methoxyisoeugenol
PS ELISA Kit馬IL-6 elisa檢測(cè)試劑盒erythro-1-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,2-diol
plasma kallikrein,KLKB1 ELISA kit馬LDH elisa檢測(cè)試劑盒threo-1-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,2-diol
alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit馬LH elisa檢測(cè)試劑盒Methyl 4-hydroxycinnamate
heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit馬LTB4 elisa檢測(cè)試劑盒Junipediol B 8-O-glucoside
heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit馬MDA elisa檢測(cè)試劑盒Methyl ferulate
HB-β ELISA Kit馬NE elisa檢測(cè)試劑盒3,4-Dimethoxycinnamic acid
α-subunits of hemoglobin,HB-α ELISA Kit馬PDGF-BB elisa檢測(cè)試劑盒Ethyl 3-(4-methoxyphenyl)propanoate
Hemoglobin H,HbH ELISA Kit馬PGE2 elisa檢測(cè)試劑盒Decursidate
Hemoglobin C,HbC ELISA Kit馬PGF2α elisa檢測(cè)試劑盒Caffeic acid
Hemoglobin,Hb ELISA Kit馬PNLIP elisa檢測(cè)試劑盒Methyl 3-(4-methoxyphenyl)propanoate
Bradykinin,BK ELISA Kit馬PROG elisa檢測(cè)試劑盒4-Allylpyrocatechol
核酸釋放劑PRAS40 (Thr246) 磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗體規(guī)格 0.1ml
PPM1A(Ser375) 磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體規(guī)格 0.1ml
PPIG (Ser376) 磷酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體規(guī)格 0.2ml
PPAR Gamma (ser112) 磷酸化過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體規(guī)格 0.1ml
PPAR alpha(Ser12) 磷酸化α型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體規(guī)格 0.1ml
PP2A alpha/beta(Tyr119) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體規(guī)格 0.1ml
PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體規(guī)格 0.1ml
技術(shù)特點(diǎn):
1 核酸釋放劑準(zhǔn)確可靠,,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),,結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA,。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí),。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),,才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),,在延伸中產(chǎn)生熒光,。