詳細介紹
細胞實驗步驟:
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min,;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3990 |
人原代脂肪細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代脂肪細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代脂肪細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人原代脂肪細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代脂肪細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代脂肪細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,,迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基,。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面,。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心,。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),,輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1 0.5mgIba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原
CRELD1 Protein Human 重組人 CRELD1 蛋白
PDGFB重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ST6GAL1 Protein Mouse 重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白
ALDH1A3重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 Protein
大鼠白介素1受體(IL-1RⅠ)試劑盒 ,,英文名: IL-1RⅠ ELISA Kit
Mouse surface membrane immunoglobulin A (mIgA) ELISA Kit 小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-6(mouse IL-6) 進口分裝
CLIAKitforIL-5(HumanIerleukin5)ELISAKIT人白介素-5
通用型雞氏菌(Salmonellaeeritidis;SE)試劑盒20次
ELISAKitIGFBP-3大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒
HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基質蛋白22(NMP-22)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9試劑盒豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
EPS8L1蛋白抗體
缺氧誘導基因1蛋白/HIGD1A抗體
人原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基PDGFB重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1 0.5mgIba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原
ALDH1A3重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 Protein
CRELD1 Protein Human 重組人 CRELD1 蛋白
ST6GAL1 Protein Mouse 重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白