兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腹水瘤細胞;S-180 人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375] TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 大鼠原代腎小球系膜細胞培養(yǎng)基

兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基

兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞最佳的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存,。

豚鼠白介素2(IL-2)試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)試劑盒

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子端粒酶(TE)ELISA 試劑盒

Human ichinella aibody (ichinella Ab) ELISA Kit 人旋毛蟲抗體(ichinella Ab)試劑盒

Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISAKit 人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)pcr檢測試劑盒分裝

HumanEpidermalgrowthfactor,EGF試劑盒人表皮生長因子(EGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織PLK3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit人胰(PAMY)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白21(MUC21)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit

人伴侶蛋白10(CPN10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit

人趨化素(CHEM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CHEM(Chemerin) ELISA Kit

人趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit

PRDM鋅指轉錄因子PRDM13抗體

淋巴細胞性白血病相關序列1抗體

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

CD31 (PECAM-1 0.5mgCD31 (PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1(抗原)

CCL11重組人 CCL11 蛋白 Protein

ISG15 Protein Human 重組人 ISG15 / G1P2 蛋白

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標簽)

兔原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基CD31 (PECAM-1 0.5mgCD31 (PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1(抗原)

ISG15 Protein Human 重組人 ISG15 / G1P2 蛋白

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標簽)

CCL11重組人 CCL11 蛋白 Protein

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。