人原代毛囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100] BGC823(人胃癌細(xì)胞) 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474 CTSC Others Human 人 CTSC / DPPI 人細(xì)胞裂解液 GBP1 Others Human 人 GBP1 人細(xì)胞裂解液 IL17F 大鼠原代角膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)

人原代毛囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代毛囊成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代毛囊成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代毛囊成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用人原代毛囊成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat calcitonin gene related peptide (CGRP) ELISA Kit 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒

Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗體(EMAb)pcr檢測試劑盒分裝

Humanacidsphingomyelinase,ASM試劑盒人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂蛋白脂酶活性比色法定量試劑盒20次

Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠促黃體激素(LH)試劑盒 ，英文名： LH ELISA Kit

Mouse procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒

ELISA 小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2) 分裝

CLIAKitforLHPoulyELISAKitLH禽類酶聯(lián)免疫試劑盒

通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitVEGFR-3血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3

小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒   小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒      小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒,，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒,、小鼠抗單核細(xì)胞抗體eisa試劑盒

小鼠釋放激素試劑盒   小鼠釋放激素試劑盒      小鼠釋放激素試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠釋放激素試劑盒,、小鼠釋放激素eisa試劑盒

小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒   小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒      小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠促上腺皮質(zhì)激素試劑盒,、小鼠促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒

小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒   小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒      小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素試劑盒、小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素eisa試劑盒

GATA2/GATA3抗體

富含亮重復(fù)蛋白8D抗體

CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原

VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein

CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白

THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白

人原代毛囊成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基DRD5 receptor(dopamine D5 receptor 0.5mgDRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原

CTSZ Protein Human 重組人 CTSZ 蛋白

CLEC4A3重組大鼠 CLEC4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

THY1 Protein Mouse 重組小鼠 CD90 / THY-1 蛋白

VAPB重組人 VAPB / VAMP-associated protein B/C 蛋白 Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測,。