小鼠原代肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：P388D1 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞) VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 IB3 Others Human 人 IB3 / B3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 兔原代腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代肺成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代肺成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分，可直接用于小鼠原代肺成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫(xiě)上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌,、無(wú)污染,，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè)。

PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周?chē)窠?jīng)髓鞘蛋白2抗原

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽)

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein

大鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)試劑盒 ,，英文名： sCD80/B7-1 ELISA Kit

Mice colorectal cancer aigen (CCA) ELISA Kit 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)試劑盒

MouseCathepsinK,cath-KELISAKit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISAKit人甲狀旁腺激素樣蛋白

同位素RNA北方雜交試劑盒5次

ELISAKitPL-A2大鼠0脂酶A2

山羊免疫球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IgA

山羊   英文名稱：   Coisol   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CO

山羊β   英文名稱：   β-Hydroxybyrate   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   Β-OHB

山羊胰島素   英文名稱：   lnsulin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   INS

豚鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒 ,，英文名： PGE2 ELISA Kit

Human cytokeratin low molecular weight (CK-LMW) ELISA Kit 人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒

Monkeybrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBKELISAKit大鼠血管舒緩激肽

細(xì)菌尿肉湯500毫升

Rabbitleoopichormone,LHELISAKit兔子促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體

磷酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗體

小鼠原代肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周?chē)窠?jīng)髓鞘蛋白2抗原

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽)