詳細介紹
細胞實驗步驟:
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍、1ml槍頭,、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液,;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,補加適量培養(yǎng)基,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài),;
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 豬原代心肌成纖維細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3618 |
豬原代心肌成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持豬原代心肌成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含豬原代心肌成纖維細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用豬原代心肌成纖維細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原
DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白
ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白
CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 Protein
大鼠接觸蛋白4(CN4)試劑盒 ,,英文名: CN4 ELISA Kit
Mouse neuophil elastase (NE) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFishi-iodothyronine,T3ELISAKit魚類三甲狀腺原
細胞基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量試劑盒20次
RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒 96T/48T
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 96T/48T
小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)試劑盒 96T/48T
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 96T/48T
小鼠抗(AT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 大鼠抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒
HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAmebiasis試劑盒人阿米巴(Amebiasis)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量試劑盒20次
MonkeyIerleukin2,IL-2ELISAKit猴白介素2(IL-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
2'-5'-寡腺苷酸合成酶2抗體
尿皮質素UCN3抗體
豬原代心肌成纖維細胞專用培養(yǎng)基ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein
P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原
CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 Protein
DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白
IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次,。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代,。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化,。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,,轉移到離心管中離心。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞,。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存,。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),,輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存,。