兔原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基,，無L- 500ml II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細胞裂解液 PGF Protein Mouse 兔原代滑膜成纖維細胞培養(yǎng)基

兔原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基

兔原代肺動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代肺動脈平滑肌細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代肺動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代肺動脈平滑肌細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

streptomycin/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白 10mgstreptomycin/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白

COL6A3 Protein Human 重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白

ART3重組人 ART3 蛋白 Protein

TEK Protein Human 重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標簽)

CD200R1重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

大鼠肌球蛋白重鏈7(MYH7)試劑盒 ,，英文名： MYH7 ELISA Kit

Mouse tissue factor (TF) ELISA Kit 小鼠組織因子(TF)試劑盒

RatEsogeeceptor,ERELISAKit 大鼠雌激素受體(ER)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFVII(HumancoagulationfactorVII)ELISAKit人Ⅶ

細胞科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴增試劑盒20次

RatMelatonin,MT/MLTELISAKit大鼠褪黑素(MT/MLT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

小鼠鉤端IgG(LepIgG)ELISAKit   ELISA.   96T

小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠神經(jīng)激肽A(NKA) ELISA 試劑盒 96T/48T

Human membrane protein (poiculin) ELISA Kit 人膜橋蛋白(poiculin)試劑盒

HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISAKit 人α1抗胰(AACT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GoatIerleukin4,IL-4試劑盒山羊白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母0酸葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量試劑盒20次

MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit小鼠Ⅱ(FⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CTBS蛋白抗體

神經(jīng)細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5抗體

兔原代肺動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基ART3重組人 ART3 蛋白 Protein

streptomycin/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白 10mgstreptomycin/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白

CD200R1重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

COL6A3 Protein Human 重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白

TEK Protein Human 重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應無菌、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。