詳細介紹
人原代甲狀腺成纖維細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3647 |
人原代甲狀腺成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持人原代甲狀腺成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代甲狀腺成纖維細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人原代甲狀腺成纖維細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml,、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml、5ml,、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,;
2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,;
3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,,混勻后,,1000rpm 離心 5min;
5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,,寫上細胞名稱,、日期,再加入 4ml 培養(yǎng)基,;
6) 離心完成后棄去上清,,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,,轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時,,可進行傳代。
2) 在生物安全柜內(nèi),,打開培養(yǎng)瓶瓶口,,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,,水平放置培養(yǎng)瓶,,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS,;
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,,將懸液吸入 15ml 離心管;
① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③);向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,,輕拍培養(yǎng)瓶,,95%左右細胞脫。
6) 1000rpm 離心 5min,;
7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,,各加入 4ml培養(yǎng)基。
8) 離心完成后,,棄上清,,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8 0.5mgFGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8 (抗原)
CASP7 Protein Human 重組人 CASP7 / caspase 7 / MCH3 蛋白
REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPCAM Protein Mouse 重組小鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠肌酐(Cr)試劑盒 ,,英文名: Cr ELISA Kit
Rabbit 8- isoprostane (8-epi-PGF2 a) ELISA Kit 兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)試劑盒
對蝦皮下和造血器官壞死病毒(HHNV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMousesmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體
體液鈣離子濃度比色法定量試劑盒20次
ELISAKit6-keto-PGF1a人6同前列腺素F1a
鴨病毒性腸病毒試劑盒 鴨病毒性腸病毒試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 鴨病毒性腸病毒試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:鴨病毒性腸病毒試劑盒,、鴨病毒性腸病毒eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
鴨白介素6試劑盒 鴨白介素6試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 鴨白介素6試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:鴨白介素6試劑盒鴨白介素6試劑盒,、鴨白介素6eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
鴨白介素4試劑盒 鴨白介素4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 鴨白介素4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:鴨白介素4試劑盒、鴨白介素4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人晶體蛋白β試劑盒 人晶體蛋白β試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人晶體蛋白β試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:人晶體蛋白β試劑盒,、人晶體蛋白βeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠總(TC)試劑盒 96T/48T
Human natural deoxyribonucleic acid aibody (n-DNA-Ab) ELISA Kit 人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)試劑盒
HumanPyridinoline,PYDELISAKit 人酚(PYD)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACAST-DIV(HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainIV)ELISAKit人抗鈣蛋白酶抑素抗體
藥品糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit小鼠p53(p53)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體
生長因子受體結(jié)合蛋白14抗體
人原代甲狀腺成纖維細胞專用培養(yǎng)基REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8 0.5mgFGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8 (抗原)
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標(biāo)簽) Protein
CASP7 Protein Human 重組人 CASP7 / caspase 7 / MCH3 蛋白
EPCAM Protein Mouse 重組小鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,,戴口罩、手套,。
?器材滅菌?:玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,,使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,,偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。