兔原代NK細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：QGY-7701細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,HA細(xì)胞 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88 H22(小鼠肝癌細(xì)胞) AsPC-1細(xì)胞，轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 CoC1細(xì)胞耐藥亞株,CoC1/DDP細(xì)胞 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H23 CL-0171NIH/3T3 兔原代冠狀動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代NK細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代NK細(xì)胞培養(yǎng)基由（）團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代NK細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代NK細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代NK細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂酶A2抗原

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin 蛋白 (HA Subunit) (His 標(biāo)簽) Protein

AGRP Protein Human 重組人 AgRP 蛋白

CRTAM重組人 CRTAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(CTnⅠ)試劑盒 ，英文名： CTnⅠ ELISA Kit

Rabbit substance P (SP) ELISA Kit 兔p物質(zhì)(SP)試劑盒

牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit小鼠絲/蘇蛋酸酶

體液甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKit5-LO/LOX人5脂加氧酶

豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶（MLCP）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬氧化酶（XOD）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬藍耳病抗體(PRRS-Ab)試劑盒

Human basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)試劑盒

Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAMA(MouseAi-myocardialaibody)ELISAKit小鼠抗心肌抗體

血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

Ephrin A2抗體

水蛭素抗體

兔原代NK細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin 蛋白 (HA Subunit) (His 標(biāo)簽) Protein

PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂酶A2抗原

CRTAM重組人 CRTAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽)

AGRP Protein Human 重組人 AgRP 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測,。