大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：RBE(人膽管癌細(xì)胞) MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細(xì)胞裂解液 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY 小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 3T3A31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 兔原代骨髓基質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠原代主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

Skp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原 0.5mgSkp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原

CALCA Protein Human 重組人 CALCA / CGRP 蛋白

NCKIPSD重組人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

LTA4H Protein Human 重組人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)試劑盒 ，英文名： ACV-RAb ELISA Kit

Rabbit compleme 3 (C3) ELISA Kit 兔補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒

鼠疫桿菌(YP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽

體液谷同酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量試劑盒20次

ELISAKitPⅢ人Ⅲ型前膠原氨基端肽

乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸   10g

EGTA   50g

伊紅Y   25g

EosinY,SodiumSalt   10x25g

鴨子胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒

Human ai Saccharomyces cerevisiae aibody (ASCA) ELISA Kit 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)試劑盒

HumanMelatonin,MTELISAKit 人褪黑素(MT)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACV-RAb(Ratai-ActivinAreceptoraibody,ACV-RAb)ELISAKit大鼠活化素A受體抗體

血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒

FITC標(biāo)記人CD69單克隆抗體

胎盤表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子1蛋白抗體

大鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基NCKIPSD重組人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

Skp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原 0.5mgSkp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CALCA Protein Human 重組人 CALCA / CGRP 蛋白

LTA4H Protein Human 重組人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測。