大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞) DU 145(人前列腺癌細(xì)胞) CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞) 敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12 C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,， 兔原代肝星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代胰腺癌細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。

結(jié)合珠蛋白(Hpt)重組蛋白 Recombinant Haptoglobin (Hpt)

ANGPT2 Protein Human 重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

APOA1重組人 ApoAI 蛋白  Protein

HA Protein H6N8 重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RAB27B重組人 RAB27B 蛋白  Protein

大鼠亨廷頓蛋白(HTT)試劑盒 ,，英文名： HTT ELISA Kit

Rat 26S proteasome (26S PSM) ELISA Kit 大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)試劑盒

RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit 大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforERELISAKit大鼠雌二醇受體

細(xì)胞0酸果糖激酶(PHOSPHOFRUCTOKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒

豬白細(xì)胞間介素8   英文名稱：   Porcine Ierleukin 8   規(guī)格：      英文縮寫：   IL-8

豬N乙酰βD基葡萄糖苷酶   英文名稱：   Porcine N-Acetyl Beta D Glucosaminidase   規(guī)格：      英文縮寫：   NAGase

豬γ干擾素   英文名稱：   Porcine γ Ierferon   規(guī)格：      英文縮寫：   γ IFN

豬受體5   英文名稱：   Porcine Somatostatin Receptor 5 Elisa Kit   規(guī)格：      英文縮寫：   SS5

豬剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA 試劑盒

Human ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒

Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlphaENOL(HumanAlpha-enolase)ELISAKit人α烯醇化酶

血液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

Peanagglinin,PNAELISAKit花生凝集素(PNA)試劑盒

LIMS3蛋白抗體

細(xì)胞命運決定因子DACH1抗體

大鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基APOA1重組人 ApoAI 蛋白  Protein

結(jié)合珠蛋白(Hpt)重組蛋白 Recombinant Haptoglobin (Hpt)

RAB27B重組人 RAB27B 蛋白  Protein

ANGPT2 Protein Human 重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H6N8 重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)