兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人細(xì)胞裂解液 MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) CL-(牛腎細(xì)胞) 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826] 兔原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代膽脂瘤細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1 0.5mgshank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原

CLEC7A Protein Human 重組人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL6 Protein Human 重組人 IL6 / Interleukin-6 蛋白

CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠固酮合酶(ALDOS)試劑盒 ,，英文名： ALDOS ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒

Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGSK(Mouseglycogensyhasekinase)ELISAKIT小鼠糖原合成酶激酶

細(xì)胞超氧化物陰離子化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

RatTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠神經(jīng)絲蛋白試劑盒   小鼠神經(jīng)絲蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠神經(jīng)絲蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠神經(jīng)絲蛋白試劑盒、小鼠神經(jīng)絲蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒   小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒,、小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒   小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒,、小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒   小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒、小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠鼠總抗氧化能力( T-AOC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human measles virus IgG (MV IgG) ELISA Kit 人麻疹病毒IgG(MV IgG)試劑盒

HumanConnexin,CxELISAKit 人間隙連接蛋白(Cx)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

DuckIerleukin-8,IL-8試劑盒鴨白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規(guī)格：96T/48T

藻類高效液相色譜法定量試劑盒20次

MouseCystatinC,Cys-CELISAKit小鼠半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T

β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素單克隆抗體

乙?；?/span>TRIM29蛋白抗體

兔原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1 0.5mgshank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原

CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CLEC7A Protein Human 重組人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL6 Protein Human 重組人 IL6 / Interleukin-6 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè)。