大鼠原代骨膜干細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：SUP-B15人Ph+急淋白血病細胞系 培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS 人微血管內(nèi)皮細胞HMMEC U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 骨肉瘤細胞,Saos-2細胞 CFPAC-1(胰腺癌細胞) 兔肝間質(zhì)細胞永生化細胞培養(yǎng)基 人原代羊水干細胞培養(yǎng)基

大鼠原代骨膜干細胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代骨膜干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代骨膜干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代骨膜干細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代骨膜干細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

GnRHR peptide 釋放激素受體抗原 0.5mgGnRHR peptide 釋放激素受體抗原

BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白

TIMP1重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 Protein

IFNGR2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNGR2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD19重組人 CD19 / Leu-12 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)試劑盒 ，英文名： OT/BGP ELISA Kit

Rabbit ierferon gamma (IFN- gamma) ELISA Kit 兔子γ干擾素(IFN-γ)試劑盒

鏈球菌B族(GBS)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLKL(Humanmixedlineagekinasedomain-like)ELISAKit人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)免疫捕獲試劑盒20次

ELISAKitOPN犬骨橋素

轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸試劑盒   48T

豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒   48T

豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒

People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13

血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)試劑盒

補體C3b-α鏈抗體

長鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白1抗體

大鼠原代骨膜干細胞專用培養(yǎng)基TIMP1重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 Protein

GnRHR peptide 釋放激素受體抗原 0.5mgGnRHR peptide 釋放激素受體抗原

CD19重組人 CD19 / Leu-12 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白

IFNGR2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNGR2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。