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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-XP3730 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 100mL/500mL |
詳細介紹
大鼠原代內(nèi)皮祖細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3730 |
大鼠原代內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代內(nèi)皮祖細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代內(nèi)皮祖細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代內(nèi)皮祖細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮祖細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機 | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml,、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml,、5ml、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；
2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱,；
3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；
6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。
傳代 （細胞傳代建議一傳二）
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。
2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；
① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min；
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；
8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；
9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原
BPHL Protein Human 重組人 BPHL 蛋白 (His 標簽)
NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
MCAM Protein Mouse 重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 標簽)
GRK6重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)試劑盒 ,，英文名： BMP-3 ELISA Kit
Rabbit ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 兔子白介素1β (IL-1β)試劑盒
3型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-3)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIS/AMH(HumanMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone)ELISAKit人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素
體液堿性0酸酶活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitE2犬雌二醇
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸試劑盒 48T
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸試劑盒 48T
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒
Human leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 人黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒
Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit 兔合成酶(NOS)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAP(HumanAprotinin)ELISAKit人
血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒20次
PorcineIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit豬白介素12(IL-12/P40)試劑盒
20號染色體開放閱讀框202抗體
中性粒細胞彈性蛋白酶ELANE抗體
大鼠原代內(nèi)皮祖細胞專用培養(yǎng)基NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原
GRK6重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
BPHL Protein Human 重組人 BPHL 蛋白 (His 標簽)
MCAM Protein Mouse 重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 標簽)
?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。
?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。
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