小鼠原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產品：SW626(人卵巢癌細胞) 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 QBC-939, 人膽管癌細胞 Human DKK1 Others Rhesus 恒河猴 人原代子宮內膜異位癥間質細胞培養(yǎng)基 小鼠原代胰島細胞培養(yǎng)基

小鼠原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代脂肪細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產品可保持小鼠原代脂肪細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產品中已包含小鼠原代脂肪細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代脂肪細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應無菌、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉錄因子抗原

BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽)

TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein

CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白

ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit

Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒

粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M

體液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitAE禽腦脊髓

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法)   48T

豬血栓素A2(TXA2)試劑盒

Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒

Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子腎上腺髓質素(ADM)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形體IgM抗體

血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量試劑盒20次

Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒

8號染色體開放閱讀框72抗體

豬藍耳病病毒GP5蛋白抗體

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ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽) Protein

BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽)

CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白