小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：TE-11(人食管癌細(xì)胞) 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12 Wish細(xì)胞,，人羊膜細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤,Hat-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 L-M TK細(xì)胞，鼠激酶缺陷細(xì)胞株 人原代椎體終板軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。

二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白 Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

IL1R2重組小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 Protein

ACVR1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

KIR2DL4重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 Protein

大鼠睪酮(T)試劑盒 ,，英文名： T ELISA Kit

Porcine ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 豬白介素17(IL-17)試劑盒

志賀氏菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHC-III/H-2III(Mousemajorhistocompatibilitycomplex-III)ELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類

體液內(nèi)毒素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCP牛銅藍(lán)蛋白

心脂肪酸結(jié)合蛋白 (H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

可溶性白細(xì)胞抗原 G(sHLA-G)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

可溶性白細(xì)胞抗原 G5(sHLA-G5)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

高遷移率族蛋白 (HMGB1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat big endothelin (Big ET) ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)試劑盒

HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor5-HIAA(Human5-hydroxyindolaceticacid)ELISAKit人5羥基吲哚乙酸

飲料同酸比色法定量試劑盒20次

Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體

組蛋白H1重組兔單克隆抗體

小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基TNFRSF4重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

RAD23同源物B(RAD23B)重組蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

GMFB重組人 GMFB 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

CX3CL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)