雞原代骨骼肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：TIMD4 Others Human 人 TIMD4 / TIM4 人細(xì)胞裂解液 NP Others SARS SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 CL-0113HO-8910(人卵巢癌細(xì)胞) 人原代直腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

雞原代骨骼肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

雞原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持雞原代骨骼肌細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含雞原代骨骼肌細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于雞原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADM重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)試劑盒 ，英文名： HDL2 ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 豬白介素1β (IL-1β)試劑盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHB(RatMethemoglobin,MHB)ELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白

體液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量試劑盒50次

ELISAKitPCK牛0酸烯醇式同酸羧激酶

心血管活性多肽   英文名稱：   Apelin   規(guī)格：      英文縮寫：   AP

轉(zhuǎn)錄因子AP-1   英文名稱：   anscription Factors AP-1   規(guī)格：      英文縮寫：   AP-1

0酸化AKT蛋白   英文名稱：   phosphorylation AKT   規(guī)格：      英文縮寫：   p-AKT

晚期糖基化終末產(chǎn)物   英文名稱：   advanced glycosylation end products   規(guī)格：      英文縮寫：   AGEs

小鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 人前膠原C端肽酶(PCP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor26SPSM(Human26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶體

飲料甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性試劑盒20次

MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

B淋巴細(xì)胞成熟因子（CD269）抗體

1號染色體開放閱讀框191抗體

雞原代骨骼肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基OSM重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

白介素3(IL3)重組蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)

SRI重組人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

CLEC5A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白