小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Sf-9(昆蟲細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 Reh人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病 人原代增生性瘢痕成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein

NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白

CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein

大鼠肝細(xì)胞生長因子激活物(HGFA)試劑盒 ，英文名： HGFA ELISA Kit

Porcine leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 豬白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒

蠟樣芽孢桿菌(BC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMDA(Humanmalondialchehyche)ELISAKit人二

體液人類巨細(xì)胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次

ELISAKitE2牛雌二醇

溴甲酚紫   5g

BromocresolPurple,FreeAcid   25g

溴酚蘭   10g

BromophenolBlue   50g

小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒

Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 人烏頭酸酶2(ACO-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor5-(Mouse5-Nucleotidase)ELISAKit小鼠5核苷酸酶

飲料L-乳酸比色法定量試劑盒20次

MouseMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒規(guī)格：96T/48T

eIF4A2蛋白抗體

AF680標(biāo)記的上皮鈣粘附分子抗體

小鼠原代膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein

Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)

TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。