大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92] MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse 人原代胰腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線(xiàn)手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫(xiě)上細(xì)胞名稱(chēng)、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿(mǎn)異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

大鼠肝受體同源物1(LRH1)試劑盒 ,，英文名： LRH1 ELISA Kit

Rat alpha 1 microglobulin (alpha 1-MG) ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒

RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 大鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforE2(MouseEsadiol)ELISAKit小鼠雌二醇

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增試劑盒20次

RatInhibinbindingprotein,INHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒

粒細(xì)胞彈性蛋白酶   英文名稱(chēng)：   Neuophil elastase   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NE

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱(chēng)：   neurofilame protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NF

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱(chēng)：   neurofilame protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NF

核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB   英文名稱(chēng)：   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NF-KB

豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)試劑盒

Human macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/SLAⅠ)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALP(Mousealkalinephosphatase)ELISAKit小鼠堿性0酸酶

血液含量比色法定量試劑盒20次

Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒

FBXW5蛋白抗體

APC標(biāo)記小鼠CD45R單克隆抗體

大鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線(xiàn)照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染,，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。