詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液,;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi),補加適量培養(yǎng)基,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 豬原代脂肪干細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3772 |
豬原代脂肪干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持豬原代脂肪干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含豬原代脂肪干細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于豬原代脂肪干細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間充質(zhì)干細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)
CD86 Protein Human 重組人 CD86 / B7-2 蛋白
CD38重組人 SCARB3 蛋白 Protein
Shiga toxin II subunit B Protein E. coli 重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
大鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)試劑盒 ,,英文名: GAPDH ELISA Kit
Pig superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 豬超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
流行性腮腺病毒(MV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforM-CSF(MouseMacrophageColony-StimulatingFactor)ELISAKit小鼠巨噬細胞集落刺激因子
體液氏菌(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20次
ELISAKitMHC綿羊主要組織相容性復合體
小鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)試劑盒 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒 96T/48T
小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睪酮(T)試劑盒
Humanamiodarone,ADELISAKit 人呋酮(AD)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenC-ReactiveProtein,CRP試劑盒雞C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-2蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISAKit小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FITC標記小鼠CD47單克隆抗體
BCL2樣12含脯蛋白抗體
豬原代脂肪干細胞專用培養(yǎng)基CD38重組人 SCARB3 蛋白 Protein
胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
CD86 Protein Human 重組人 CD86 / B7-2 蛋白
Shiga toxin II subunit B Protein E. coli 重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,,將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次,。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代,。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化,。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,,轉(zhuǎn)移到離心管中離心。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞,。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存,。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),,輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。