人原代頜下腺囊腫細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 人氣管平滑肌細(xì)胞RNAHTSMC miRNA5 μg KB-C1.5細(xì)胞,，細(xì)胞 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 人喉癌上皮細(xì)胞 人原代牙周膜干細(xì)胞培養(yǎng)基 豬原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代頜下腺囊腫細(xì)胞專用培養(yǎng)基

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。

IASPP(inhibitory member of the ASPP family 0.5mgIASPP(inhibitory member of the ASPP family) 細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD33重組食蟹猴 / 恒河猴 CD33 / Siglec-3 蛋白 Protein

PTPN2 Protein Mouse 重組小鼠 PTPN2 / TC-PTP 蛋白 (aa 2-314, His 標(biāo)簽)

KLK4重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 Protein

大鼠甘膽酸(CG)試劑盒 ,，英文名： CG ELISA Kit

Porcine esogen (E) ELISA Kit 豬雌激素(E)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMCP-4/CCL13(Mousemonocytechemotacticprotein4)ELISAKit小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4

體液糖類總量鐵比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIL-2綿羊白介素2

小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒   小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒,、小鼠誘導(dǎo)型合成酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒   小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒,、小鼠內(nèi)皮型合成酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒   豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒、豚鼠神經(jīng)肽Beisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠游離脂肪酸試劑盒   小鼠游離脂肪酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠游離脂肪酸試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠游離脂肪酸試劑盒,、小鼠游離脂肪酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Lyme IgG (Lyme-IgG) ELISA Kit 人萊姆IgG(Lyme-IgG)試劑盒

Humanα-GlucosidaseELISAKit 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(MAGAb)ELISAKit大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體

嬰兒配方食品(S-Methylmethionine)比色法定量試劑盒20次

MouseIerleukin27,IL-27ELISAKit小鼠白介素27(IL-27)試劑盒規(guī)格：96T/48T

G蛋白α亞單位蛋白Q抗體

CD99樣蛋白2抗體

人原代頜下腺囊腫細(xì)胞專用培養(yǎng)基CD33重組食蟹猴 / 恒河猴 CD33 / Siglec-3 蛋白 Protein

IASPP(inhibitory member of the ASPP family 0.5mgIASPP(inhibitory member of the ASPP family) 細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)

KLK4重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 Protein

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PTPN2 Protein Mouse 重組小鼠 PTPN2 / TC-PTP 蛋白 (aa 2-314, His 標(biāo)簽)