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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-XP3806 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
詳細(xì)介紹
小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3806 |
小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項(xiàng)
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機(jī) | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml,、5ml,、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；
2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；
3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；
4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；
5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；
6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）
1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；
① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；
② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,；
7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；
8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；
9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。
?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。
?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。
CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關(guān)肽
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
CD28重組小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
MBL1 Protein Mouse 重組小鼠 MBL1 蛋白
CMBL重組人 CMBL 蛋白 Protein
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)試劑盒 ，英文名： SP-C ELISA Kit
Porcine macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 豬巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMAPKAPK3(Humanmitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase3)ELISAKit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3
體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50次
ELISAKitMrNV羅氏沼蝦諾達(dá)病毒
血管緊張素1 英文名稱： Human Angiotensin 1 規(guī)格： 英文縮寫： AT1
血管緊張素2受體1抗體 英文名稱： Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody 規(guī)格： 英文縮寫： AT2R1-Ab
血管緊張素2受體1型 英文名稱： Human Angiotensin 2 receptor Type 1 規(guī)格： 英文縮寫： AG2
血管緊張素2 英文名稱： Human Angiotensin 2 規(guī)格： 英文縮寫： Ang 2/AT2
小鼠乙型肝表面抗原(HBsAg)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 21 (CR2/sCD21) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)試劑盒
Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor6-keto-PGF1aELISAKit大鼠6同前列腺素F1a
飲料D-乳酸比色法定量試劑盒20次
Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ試劑盒規(guī)格：96T/48T
PE標(biāo)記小鼠CD54/ICAM-1單克隆抗體
ICEBERG蛋白抗體
小鼠原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)
PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
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