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詳細介紹
羊原代卵巢顆粒細胞專用培養(yǎng)基
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3824 |
羊原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經過長期測試,，本產品可保持羊原代卵巢顆粒細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產品中已包含羊原代卵巢顆粒細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于羊原代卵巢顆粒細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代卵巢顆粒細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機 | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml,、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml、5ml,、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；
2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱,；
3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率；
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；
6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。
傳代 （細胞傳代建議一傳二）
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。
2) 在生物安全柜內,，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內的培養(yǎng)基；
3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；
4) 向瓶內加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫。
6) 1000rpm 離心 5min,；
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。
8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中；
8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；
9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存,。
?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。
?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。
半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein
CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein
大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)試劑盒 ,，英文名： PYY ELISA Kit
Porcine hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 豬輕化1(HYD)試劑盒
動物源性成分(18S)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLy6a(Humanlymphocyteaigen6complexlocusA)ELISAKit人淋巴細胞抗原6復合物基因座A
體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50次
ELISAKitNO雞血清
小鼠轉化生長因子-β2(mouse TGF-β2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠可溶性粒細胞靶受體(mouse sEM-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠端粒酶(mouse Telomerase) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)試劑盒 96T/48T
Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 人可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒
HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISAKit 人毛細血管擴張性共濟失調突變基因(ATM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor12-HETE(Human20-hydroxyeicosateaenoicacid)ELISAKit人12羥二十烷四烯酸
飲料檸檬酸比色法定量試劑盒20次
MouseLactoferrin,LTF/LFELISAKit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ZC3H7B蛋白抗體
PE-Cy5標記小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體
羊原代卵巢顆粒細胞專用培養(yǎng)基NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein
半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)
NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
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