小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：非洲綠猴腎細胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1] J82(人膀胱癌細胞) AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 人非色素睫狀上皮細胞 (HNPCEpiC) SKOV-3/DDP細胞 人原代神經(jīng)鞘膜瘤細胞永生化細胞培養(yǎng)基 小鼠原代腎盂輸尿管連接

小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)

CD1B & B2M Protein Human 重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein

IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標簽)

S100A9重組人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein

大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒 ,，英文名： Resistin ELISA Kit

Porcine iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒

番茄特定基因序列(PG)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforL-Selectin/CD62LELISAKit大鼠L選擇素

通用HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液100毫升

ELISAKitsEPCR雞可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體

小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒   96T/48T

小鼠組織多肽抗原(TPA)試劑盒   96T/48T

小鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)試劑盒   96T/48T

小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒   96T/48T

小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒

HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 人溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor17-OHP(Mouse17-Hydroxyprogesterone)ELISAKit小鼠17羥孕同

飲料環(huán)(cyclamate)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

1號染色體開放閱讀框141抗體

Synaptophysin單克隆抗體

小鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein

SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)

S100A9重組人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein

CD1B & B2M Protein Human 重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白

IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。