大鼠原代真皮毛乳頭細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd 人正常皮膚細胞,，TE 353.Sk細胞 HO-8910(卵巢癌細胞) MDA-MB-231細胞，癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7402細胞 CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞) 高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd 人正常皮膚細胞 人原代乳腺成纖維細胞培養(yǎng)基 小鼠原代主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基

大鼠原代真皮毛乳頭細胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代真皮毛乳頭細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代真皮毛乳頭細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代真皮毛乳頭細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用大鼠原代真皮毛乳頭細胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存,。

CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原

IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標簽)

SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein

ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標簽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein

大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)試劑盒 ,，英文名： PKIβ ELISA Kit

L selectin (L-Selectin/CD62L) ELISA Kit 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑

RatIerleukin3,IL-3ELISAKIT 大鼠白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCyclin-D2(MouseCyclin-D2)ELISAKit小鼠細胞周期素D2

細胞色素P450亞酶CYP2C8(DBF)活性熒光定量試劑盒20次

Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISAKit大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T

三0酸腺苷酶   英文名稱：   Adenosine iphosphate   規(guī)格：      英文縮寫：   ATP

血管緊張素Ⅱ一型受體抗原   英文名稱：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   規(guī)格：      英文縮寫：   AT1R

抗血管緊張素‖受體︱型自身抗體   英文名稱：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   規(guī)格：      英文縮寫：   AT1R-AA

血管緊張素Ⅰ   英文名稱：   AngiotensinⅠ   規(guī)格：      英文縮寫：   ANGⅠ

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 ，英文名： IgE ELISA Kit

Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)試劑盒

MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猴可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBid(HumanBH3ieractingdomaindeathagonist)ELISAKit人BH3結構域凋亡誘導蛋白

細菌尿素瓊脂平板50個

RabbitLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit兔鉤端IgG(LepIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

9號染色體開放閱讀框79抗體

γS-crystallin蛋白抗體

大鼠原代真皮毛乳頭細胞專用培養(yǎng)基SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein

CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein

IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標簽)

ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標簽)

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。