小鼠原代軟骨細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產品：恒河猴腎細胞;MMK3 A-498(人癌細胞) 人結直腸腺癌細胞;HT-29 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 張氏肝細胞，HeLa[Chang Liver]細胞 LLC-PK1細胞,，豬腎細胞 MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人 人原代氣管上皮細胞培養(yǎng)基 羊原代髓核細胞培養(yǎng)基

小鼠原代軟骨細胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代軟骨細胞用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經過長期測試,，本產品可保持小鼠原代軟骨細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產品中已包含小鼠原代軟骨細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代軟骨細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內,，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存。

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

大鼠蛋白激酶C(PKC)試劑盒 ,，英文名： PKC ELISA Kit

Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒

病毒H7亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關0脂酶A2

通用石蠟切片HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升

ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體

小鼠血管內皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠血管內皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

大鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)試劑盒

Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP試劑盒雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

APC標記人CD105單克隆抗體

表皮生長因子受體單克隆抗體

小鼠原代軟骨細胞專用培養(yǎng)基BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。