兔原代外根鞘細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E H4-IIE(大鼠肝癌細胞 ) 人肝永生化細胞;THLE-3 Li-7人肝癌細胞 Li-7 human hepatocarcinoma cells 1640+10%FBS NA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Babol/36/2005) 人原代內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)基 兔原代淚道上皮

兔原代外根鞘細胞專用培養(yǎng)基

兔原代外根鞘細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代外根鞘細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含兔原代外根鞘細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代外根鞘細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

GHR重組大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

IL10RB Protein Mouse 重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽)

TFRC重組人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)試劑盒 ,，英文名： CRH ELISA Kit

Mouse 17 hydroxycoicosteroid (17-OHCS) ELISA Kit 小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)試劑盒

ELISA 小鼠腦肽(mouse BNP)  進口分裝

CLIAKitforLIFELISAKit大鼠白血病抑制因子

通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitAflatoxin霉毒素

天青B   1g

AzureB   5g

   50KU

Baciacin   250KU

小鼠1,4,5-三0酸肌醇(IP3)試劑盒 96T/48T

Rat cardioophin 1 (CT-1) ELISA Kit 大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒

Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit 人反三甲狀腺原(3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanC-Polypeptide,CP試劑盒人C多肽(CP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CSF1R激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProteinCELISAKit人蛋白C(ProteinC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Fbxw7蛋白抗體

泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體

兔原代外根鞘細胞專用培養(yǎng)基GHR重組大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

TFRC重組人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

IL10RB Protein Mouse 重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽)