詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi),,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 兔原代小腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3885 |
兔原代小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代小腸粘膜上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含兔原代小腸粘膜上皮細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于兔原代小腸粘膜上皮細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,,將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,,輕輕漂洗細胞,,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次,。
加入新的培養(yǎng)基,。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面,。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心,。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞,。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IKI3 family protein 0.5mgIKI3 family protein
GABARAPL1 Protein Human 重組人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白
CD2重組食蟹猴 CD2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標簽)
IRAK4重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白 Protein
大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒 ,英文名: H ELISA Kit
Mouse collagen type I (Col I) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)試劑盒
ELISA 小鼠CXCL3(mouse CXCL-3) 進口分裝
CLIAKitforLHRHELISAKit大鼠黃體生成素釋放激素
通用型HCV亞型(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒(1a,、1b、2a,、2b,、3a、3b)20次
AIL-R3腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒 兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒,、兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔子中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 兔子中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒,、兔子中性粒細胞彈性蛋白酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,、兔子纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔子雙氫睪試劑盒 兔子雙氫睪試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子雙氫睪試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子雙氫睪試劑盒、兔子雙氫睪eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠二(MDA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human specifie macrophage arming factor (SMAF) ELISA Kit 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)試劑盒
Humanmyosinlightchainkinase,MLCKELISAKit 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBradykinin,BK試劑盒人血管舒緩激肽(BK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次
Humansreumalbumin,,HSAELISAKit人血清白蛋白(HSA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FITC標記小鼠CD49b單克隆抗體
分離蛋白SCRN2抗體
兔原代小腸粘膜上皮細胞專用培養(yǎng)基CD2重組食蟹猴 CD2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IKI3 family protein 0.5mgIKI3 family protein
IRAK4重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白 Protein
GABARAPL1 Protein Human 重組人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白
LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標簽)