兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 SK-OV-3(人癌細(xì)胞) CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 LYN Others Human 人 Lyn Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 人原代腦膠質(zhì)瘤成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 豬原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

RGS2 peptide G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原 0.5mgRGS2 peptide G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原

GABARAP Protein Human 重組人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白

REG3G重組人 REG3G / PAP1B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠雌酮(E1)試劑盒 ，英文名： E1 ELISA Kit

Mouse collagen type II (Col II) ELISA Kit 小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)試劑盒

ELISA 小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLHELISAKit魚(yú)促黃體激素

通用型HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitGFAP神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白

兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子血管緊張素1型受體（AT1）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒

Human aspaate aminoansferase (AST) ELISA Kit 人天門冬氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒

Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNF試劑盒人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒

植物組織可溶性總核蛋白高制備試劑盒10次

Humansquamouscellcarcinomarelatedaigen,SCCAgELISAKit人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)試劑盒

G蛋白α抑制蛋白1抗體

鈣激活氯離子通道4蛋白抗體

兔原代膀胱間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RGS2 peptide G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原 0.5mgRGS2 peptide G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原

REG3G重組人 REG3G / PAP1B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GABARAP Protein Human 重組人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)

CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染,，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè)。