小鼠原代星形膠質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人肺動脈成纖維細胞 (HPAF) VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細胞裂解液 CL-0340GH3(大鼠垂體瘤細胞) 直結(jié)腸平滑肌細胞Many OVCaR-3 人癌細胞 BEL/FU 人肝癌尿耐藥株 人原代脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 大鼠原代耳軟骨細胞培養(yǎng)基

小鼠原代星形膠質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代星形膠質(zhì)細胞用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代星形膠質(zhì)細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代星形膠質(zhì)細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代星形膠質(zhì)細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原

IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標(biāo)簽) Protein

GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白

ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠雌二醇受體(ER)試劑盒 ,，英文名： ER ELISA Kit

Mouse 5 nucleotidase (5-) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶(5-)試劑盒

ELISA 小鼠CXCL1/KC(mouse KC)  進口分裝

CLIAKitforLF/LTF(MouseLactoferrin)ELISAKIT小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白

通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitMIF巨噬細胞移動抑制因子

同型半胱酸（Hcy）測定試劑盒（酶循環(huán)法）

β-（D3-H）測定試劑盒（酶比色法）

D-二聚體（D-Dimer）測定試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）

轉(zhuǎn)鐵蛋白（F）測定試劑盒（免疫比濁法）

小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasin releasing peptide (GRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放多肽(GRP)試劑盒

Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 人能a1A受體(ADRA1A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMR試劑盒人協(xié)同刺激分子受體(CMR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CLK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit人蛋白激酶A(PKA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HERC4 E3泛素蛋白連接酶抗體

干擾素α抗體

小鼠原代星形膠質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標(biāo)簽) Protein

rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原

ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。