人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 Calu-1(人肺癌細(xì)胞) METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞 人原代晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。

Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)

FKBP14 Protein Human 重組人 FKBP14 蛋白

EPHB1重組食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HTRA2重組人 HTRA2 / OMI 蛋白 Protein

大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 ,，英文名： HSP-70 ELISA Kit

Mouse E cadherin / epithelial cadherin (E-Cad) ELISA Kit 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)試劑盒

ELISA 小鼠C-肽(mouse C-peptide)  進口分裝

CLIAKitforLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物

通用型KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitsICAM-1猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠單胺氧化酶A(MAOA)試劑盒 96T/48T

Human peptidoglycan (PG) ELISA Kit 人肽聚糖(PG)試劑盒

HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI試劑盒人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物支鏈淀粉比色法定量試劑盒20次

HumaGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ORC5L蛋白抗體

黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體

人原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基EPHB1重組食蟹猴 EphB1 / EPHT2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)

HTRA2重組人 HTRA2 / OMI 蛋白 Protein

FKBP14 Protein Human 重組人 FKBP14 蛋白

FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)