詳細介紹
大鼠原代羊膜間充質干細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3914 |
大鼠原代羊膜間充質干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持 大鼠 原代羊膜間充質干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含 大鼠 原代羊膜間充質干細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于 大鼠 原代羊膜間充質干細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間充質干細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代間充質干細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml,、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml,、5ml、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,;
2) 準備一支 15ml 離心管,,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預熱;
3) 戴上護目鏡,,厚毛線手套后,,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,,混勻后,1000rpm 離心 5min,;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,,寫上細胞名稱、日期,,再加入 4ml 培養(yǎng)基,;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,,轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,,混勻后轉入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,,可進行傳代,。
2) 在生物安全柜內,打開培養(yǎng)瓶瓶口,,收集瓶內的培養(yǎng)基,;
3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,,吸棄 PBS;
4) 向瓶內加入消化液 1ml,,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,,將懸液吸入 15ml 離心管,;
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和(避免吹打③),;向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,,95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min;
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,,各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,,將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,,然后轉入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉入液氮罐中保存,。
DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原
ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein
大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)試劑盒 ,,英文名: FoxP3 ELISA Kit
Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒
ELISA 小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(mouse GM-CSF) 進口分裝
CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶
通用型N-乙酰轉移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量試劑盒20次
ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素
小鼠補體成分5 英文名稱: Mouse Compleme Compone 5 規(guī)格: 英文縮寫: C5
小鼠結締組織生長因子 英文名稱: Mouse Connective Tissue Growth Factor 規(guī)格: 英文縮寫: CTGF
小鼠皮質 英文名稱: Mouse Coicosterone 規(guī)格: 英文縮寫: CO
小鼠肌酐 英文名稱: Mouse Creatinine 規(guī)格: 英文縮寫: CT
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒
Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminB6,VB6ELISAKit人B6(VB6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PE-Cy5標記人CD62E/CD62P單克隆抗體
環(huán)指蛋白207抗體
大鼠原代羊膜間充質干細胞專用培養(yǎng)基CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein
DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原
IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein
ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,,戴口罩、手套,。
?器材滅菌?:玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,,使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,,應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,,偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。