詳細介紹
細胞實驗步驟:
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍、1ml槍頭,、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min,;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液,;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi),,補加適量培養(yǎng)基,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài),;
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 兔原代骨髓基質干細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3918 |
兔原代骨髓基質干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持兔原代骨髓基質干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代骨髓基質干細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于兔原代骨髓基質干細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間充質干細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代間充質干細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可,。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次,。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代,。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化,。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,,轉移到離心管中離心。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞,。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,,放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存,。
將細胞轉移到離心管中離心,,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),,輕輕吹打重懸細胞,。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,,再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
SOD2 (superoxide-dimutase-2 0.5mlSOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原
DRAXIN Protein Human 重組人 DRAXIN 蛋白
ENSA重組人 ENSA / Endosulfine alpha 蛋白 Protein
PDGFRA Protein Human 重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白
DDR1重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein
大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)試劑盒 ,,英文名: LAMA1 ELISA Kit
Mouse N- acetyl beta -D- Glucosaminidase (NAG) ELISA Kit 小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒
ELISA 小鼠(mouse Cytochrome C) 進口分裝
CLIAKitforLCA/CD45(Humanleukocytecommonaigen)ELISAKit人白細胞共同抗原
通用型RNA酶保護法試劑盒5次
ELISAKitE-Selectin/CD62E猴E選擇素
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 96T/48T
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 96T/48T
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 96T/48T
小鼠骨保護素配體(OPGL)試劑盒 96T/48T
小鼠抗受體(A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human heat shock protein 27 (HSP-27) ELISA Kit 人熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒
Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit 人游離血紅蛋白(f-Hb)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAngiogenin,ANG試劑盒人血管生長素(ANG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物非蛋白/游離巰基含量熒光定量試劑盒20次
MacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISAKit羅氏沼蝦諾達病毒(MrNV)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PE標記人CD81單克隆抗體
肌球蛋白10抗體
兔原代骨髓基質干細胞專用培養(yǎng)基ENSA重組人 ENSA / Endosulfine alpha 蛋白 Protein
SOD2 (superoxide-dimutase-2 0.5mlSOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原
DDR1重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein
DRAXIN Protein Human 重組人 DRAXIN 蛋白
PDGFRA Protein Human 重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白