詳細介紹
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml,、5ml,、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
MS-5 細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 細胞系專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 1*125ml/500ml |
貨號 | GOY-XP4296 |
英文名稱 | MS-5 |
產(chǎn)品介紹
MS-5細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持MS-5細胞最佳的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含 MS-5細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于MS-5 細胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分
RPMI 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基 445 mL
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 50 mL
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,,保存2個月,;-20℃,避光,,保存6個月。
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可。
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,;
2) 準備一支 15ml 離心管,,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,;
3) 戴上護目鏡,,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,,混勻后,1000rpm 離心 5min,;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,,寫上細胞名稱、日期,,再加入 4ml 培養(yǎng)基,;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,,轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,,可進行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,;
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,,吸棄 PBS;
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,,將懸液吸入 15ml 離心管,;
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③),;向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,,95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min;
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,,各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,棄上清,,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,,將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套,戴口罩,、手套,。
?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,,應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,,偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。
小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA 試劑盒
Rat visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)試劑盒分裝
HumanAquaporin2,AQP-2試劑盒人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
植物乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性熒光定量試劑盒20次
Humaissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒
大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 ,英文名: hs-CRP ELISA Kit
Mouse FMS like tyrosine kinase 3 (Flt3) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪激酶3(Flt3)試劑盒
ELISA 小鼠心肌鈣蛋白T(mouse c) 分裝
CLIAKitforLDL(Humanlowdensitylipoprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白
通用型LB細菌培養(yǎng)液500毫升
ELISAKitLMA猴抗肝細胞膜抗體
細小病毒(PPV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
細小病毒(PPV)核酸試劑盒 48T
偽狂犬病毒(PRV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
偽狂犬病毒(PRV)核酸試劑盒 48T
p53依賴細胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白抗體
琥珀酸脫氫酶的組合因子1抗體
SDC1重組大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原 0.5mgFe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
TXN2重組人 Thioredoxin-2 / TXN2 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽)
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A?
MS-5 細胞專用培養(yǎng)基Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原 0.5mgFe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽)
SDC1重組大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白
TXN2重組人 Thioredoxin-2 / TXN2 蛋白 (His 標簽) Protein