MDA-MB-415 細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人心肌細(xì)胞裂解物HCML 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3 肝癌細(xì)胞，BEL-7404細(xì)胞 CEL細(xì)胞,，雞胚原代肝細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 CTLL-2(小鼠T細(xì)胞) 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF HELF 大鼠原代腸道干細(xì)胞培養(yǎng)基 SV-HUC-1 細(xì)胞培養(yǎng)基

MDA-MB-415 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

MDA-MB-415細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持MDA-MB-415細(xì)胞最佳的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含 MDA-MB-415 細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于MDA-MB-415 細(xì)胞的培養(yǎng),。

產(chǎn)品主要成分

L15 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                         445ml

特級(jí)胎牛血清                            50 ml

 運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃,，避光，保存2個(gè)月,；?

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠雄激素(androgen)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 大鼠甘肽/甘素(GAL)試劑盒

Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenAcetoaceticacid,ACAC試劑盒雞乙酰乙酸檢測(ACAC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雜交清洗液500毫升

MouseHyaluronicacid,HAELISAKit小鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)試劑盒 ,，英文名： FABP3 ELISA Kit

Pla vitamin A (VA) ELISA Kit 植物A(VA)試劑盒

Mouseplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHumanai-Ku-aibodyELISAKit人抗Ku抗體

細(xì)胞FY激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitACTH大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素

小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒

小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒

小鼠血清(NO)試劑盒

小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒

生長停滯特異性蛋白8抗體

AF680標(biāo)記的β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體

IFNA1重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 Protein

GPR30(G Protein Coupled Receptor 30 0.5mgGPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原

SLC3A2重組人 SLC3A2 / CD98 蛋白 Protein

CD68 Protein Human 重組人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (aa 1-319, His 標(biāo)簽)

AGO2 Protein ?

MDA-MB-415 細(xì)胞專用培養(yǎng)基GPR30(G Protein Coupled Receptor 30 0.5mgGPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原

CD68 Protein Human 重組人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (aa 1-319, His 標(biāo)簽)

IFNA1重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 Protein

AGO2 Protein Mouse 重組小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白

SLC3A2重組人 SLC3A2 / CD98 蛋白 Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。