PC-3M 細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229] HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 小鼠淋巴瘤細(xì)胞; 人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562 大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 H22 小鼠肝癌細(xì)胞 WPMY-1 細(xì)胞培養(yǎng)基 CHO-K1（懸?。?細(xì)胞培養(yǎng)基

PC-3M 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

PC-3M細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持PC-3M細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含PC-3M細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于PC-3M細(xì)胞的培養(yǎng),。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              445 mL

特級(jí)胎牛血清                                             50 mL

 運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃,，避光，保存2個(gè)月,；?

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)試劑盒

HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

桌面DNA清除溶液500毫升

Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠吻素1(KISS1)試劑盒 ,，英文名： KISS1 ELISA Kit

Mouse aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒

MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 小鼠N-乙?；?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforHSF1(MouseHeatShockFactor1)ELISAKit小鼠熱休克因子1

細(xì)胞NADPH還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIFI16/p16大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16

兔載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒

兔載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒

兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒

兔抑瘤素M(OSM)試劑盒

鋅指蛋白258抗體

KB抑制蛋白激酶α/β抗體

PTPRC重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白1(HCRP1)重組蛋白 Recombinant Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1 (HCRP1)

BTC重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 Protein

GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SFTPD Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SFTPD /?

PC-3M 細(xì)胞專用培養(yǎng)基HtrA絲肽酶4(HTRA4)重組蛋白 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)

GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IFNA4重組小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PVR Protein Rat 重組大鼠 CD155 / PVR / NECL5 蛋白

TMEM27重組人 TMEM27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。