詳細介紹
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,,戴口罩、手套,。
?器材滅菌?:玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,,應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,,偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,定期檢查氣體濃度與流量,,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。