大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：LS 180(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞) SERPINA11 Others Mouse 小鼠 SERPINA11 兔原代胃黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 兔原代椎體終板軟骨細(xì)

大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。

CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)

CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白

IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白

VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein

大鼠熱休克蛋白40(HSP40)試劑盒 ,，英文名： HSP40 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒

RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因

細(xì)胞超氧化物陰離子比色法定量試劑盒20次

Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠試劑盒   小鼠試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒,、小鼠試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠生長激素釋放肽試劑盒   小鼠生長激素釋放肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠生長激素釋放肽試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠生長激素釋放肽試劑盒,、小鼠生長激素釋放肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

小鼠生長激素釋放多肽試劑盒   小鼠生長激素釋放多肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠生長激素釋放多肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠生長激素釋放多肽試劑盒、小鼠生長激素釋放多肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

小鼠損傷分子試劑盒   小鼠損傷分子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠損傷分子試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠損傷分子試劑盒,、小鼠損傷分子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒

HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP試劑盒鴨環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對一甲基)10/20次

MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ARC1抗體

非活性雙特異性磷酸酶抗體27抗體

大鼠原代心肌成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)

VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein

CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白

IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白