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產(chǎn)品描述：

Western及IP細胞裂解液,，是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液,。本細胞裂解液裂解的細胞，可以用于PAGE,，Western,，免疫沉淀和免疫共沉淀。使用本裂解液時,，用戶可以根據(jù)具體用途自行添加特定抑制劑或者不添加抑制劑,。Western及IP細胞裂解液的主要成分為Tris-HCl，NaCl,，去垢劑,。可以有效抑制蛋白的降解,，并維持原有的蛋白間相互作用,。

使用本裂解液獲得的蛋白樣品，如果用于酶活性檢測或一些生物小分子的檢測,，需要測試標準品用本裂解液稀釋后是否會顯著影響標準曲線,。如果本裂解液對于標準曲線無顯著影響，則可以使用本裂解液,。用Western及IP細胞裂解液裂解得到的蛋白樣品,，可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑等干擾物質(zhì),，不能用Bradford法測蛋白濃度,。 

使用方法：

1、對于培養(yǎng)細胞樣品
（1）取適當量的裂解液,，根據(jù)需要自行確定添加適當?shù)囊种苿┗虿惶砑右种苿?br style="box-sizing: border-box; font-family: "Microsoft YaHei"; text-wrap: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255);"/>（2）對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,，可以不洗),。按照 6 孔板每孔加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸,。通常裂解液接觸細胞 1~2sec 后，細胞就會被裂解,。
（3）對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞加入 100~200uL裂解液的比例加入裂解液,。再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 5~10×105 細胞/管,，然后再裂解。大團的細胞較難裂解充分,，而少量的細胞由于裂解液容易和細胞充分接觸,，相對比較容易裂解充分。
（4）充分裂解后,，10000~14000g離心3~5min,，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE,、Western,、免疫沉淀、免疫共沉淀,、酶或生物小分子檢測等操作,。
注：裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加100uL 裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量至 150uL 或 200uL,。
2,、對于組織樣品
（1）取適當量的裂解液，根據(jù)需要自行確定添加適當?shù)囊种苿┗虿惶砑右种苿?br style="box-sizing: border-box; font-family: "Microsoft YaHei"; text-wrap: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255);"/>（2）把組織切成細小的碎片,。
（3）按照每 20mg 組織加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液,。
（如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量,。)
（4）用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
（5）充分裂解后,，10000~14000g 離心 3~5min,，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE,、Western,、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
（6）如果組織樣品本身非常細小,，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,，用于后續(xù)實驗,。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器,，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分,。

注意事項：

1、若頻繁使用本品,，可以短期4℃保存,。若不是頻繁使用本品，建議第一次使用本品的時候?qū)⒘呀庖悍盅b凍存,，避免反復凍融,。
2、若需添加蛋白酶或磷酸酶抑制劑,，可使用我司的廣譜蛋白酶抑制劑混合物（abs9161）,，廣譜磷酸酶抑制劑混合物（abs9162），以及PMSF,，或者自行準備,。
3、裂解樣品的所有步驟需在冰上或4℃進行,。
4,、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。