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腫瘤的免疫主要是T細(xì)胞來執(zhí)行的,，T細(xì)胞是我們體內(nèi)進(jìn)化的最高等,，也是最多樣的一類細(xì)胞。T細(xì)胞的多樣性由于TCR的豐富多樣,，本質(zhì)上由V(D)J重組導(dǎo)致,，T細(xì)胞受體識別靶細(xì)胞表面特異性抗原，一個抗原就對應(yīng)著一個T細(xì)胞克隆,，可達(dá)10¹⁵-10¹⁸種,，每個克隆都具有特殊的TCR。通過正選擇和負(fù)選擇的進(jìn)一步篩選,，最終形成大約10⁶到10¹⁰種的循環(huán)T細(xì)胞克隆,。其中大概一般可能有幾萬種到幾十萬種。是可以識別腫瘤抗原的,，叫腫瘤抗原特性T細(xì)胞,。

TCR結(jié)構(gòu)示意圖

腫瘤抗原特異性T細(xì)胞檢測之前必須要了解一下腫瘤免疫循環(huán)理論，它涉及到我們的樣本來源,。根據(jù)腫瘤免疫循環(huán)理論,，癌細(xì)胞釋放腫瘤抗原。腫瘤抗原被抗原遞呈細(xì)胞吞噬之后,，抗原遞呈細(xì)胞就會歸巢,，回流到我們的引流淋巴結(jié)，在引流淋巴結(jié)內(nèi),，抗原被抗原遞呈細(xì)胞吞噬處理之后就會激活,。可以被腫瘤抗原的腫瘤抗原特性T細(xì)胞識別,，這個腫瘤抗原特性T細(xì)胞一旦被激活成熟之后,。就會進(jìn)入血液循環(huán)，從而去尋找它的殺傷目標(biāo),。當(dāng)它循環(huán)到腫瘤組織中,，發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中有對應(yīng)的腫瘤抗原，就會浸潤到腫瘤組織內(nèi)去殺死腫瘤細(xì)胞,，這叫腫瘤免疫循環(huán),。所以我們機(jī)體內(nèi)有三個位置是有腫瘤抗原性T細(xì)胞的，引流淋巴結(jié),、外流血和腫瘤組織,。

癌癥-免疫周期

腫瘤抗原特性T細(xì)胞理論上來說分為三大類，一類可以識別腫瘤腫瘤抗原,，可以殺死這個被識別的含有腫瘤抗原的腫瘤細(xì)胞,，這類我們叫做效應(yīng)性腫瘤抗原T細(xì)胞,，第二大類就是調(diào)節(jié)型腫瘤抗原T細(xì)胞，這類細(xì)胞可以識別腫瘤抗原,，但是對癌細(xì)胞沒有殺傷功能,，反而因?yàn)樗鼤种芓 effect，從而間接促進(jìn)癌細(xì)胞的生長,。第三大類是無能型T細(xì)胞,，它可以識別腫瘤，抗原,，也可以識別癌細(xì)胞，但識別癌細(xì)胞之后,，不具有殺傷功能,。

腫瘤抗原特性T細(xì)胞，是我們機(jī)體內(nèi)去特異性識別和殺傷癌細(xì)胞的最主要的細(xì)胞,。腫瘤細(xì)胞跟正常的細(xì)菌和病毒最大的區(qū)別就是具有高度異質(zhì)性,，沒有占主導(dǎo)地位的抗原，很難找到共有通用占主導(dǎo)地位抗原,，這也是開發(fā)腫瘤疫苗最大的一個難點(diǎn),，89年研究者發(fā)現(xiàn)了一類可以特異性識別某些腫瘤抗原的T細(xì)胞，但目前為止種類不是很多,。

腫瘤抗性特性T細(xì)胞檢測的應(yīng)用和檢測意義有哪些呢,？

1）癌癥免疫治療藥物研究（PD1抗體、雙特異性抗體等）：經(jīng)過藥物治療后是否增加了腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的數(shù)量和總含量,；

2）新藥物研發(fā),、聯(lián)合用藥等（該治療方法，尤其是化療是否影響了機(jī)體內(nèi)抗原特異性T細(xì)胞的總含量）,；

3）溶瘤病毒研究等（溶瘤病毒殺死癌細(xì)胞后是否增加了機(jī)體內(nèi)腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的含量）,；

4）癌癥疫苗研發(fā)（新抗原疫苗、mRNA疫苗,、DC疫苗等是否誘導(dǎo)了足夠的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞）,；

5）癌癥納米治療藥物研發(fā)（很多納米藥物或者免疫調(diào)節(jié)劑通過誘發(fā)ICD效應(yīng)發(fā)揮作用，如果誘導(dǎo)產(chǎn)生了ICD效應(yīng),，應(yīng)該能增加腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的總含量）,；

6）放射治療：對腫瘤組織不同劑量的放射量（是否能夠通過放射治療誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生更多的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞）；

7）光熱治療：通過光敏劑,、熱敏劑等殺死癌細(xì)胞后,，癌細(xì)胞釋放的抗原是否誘導(dǎo)產(chǎn)生了更多的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞。

目前市面上主流的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞檢測技術(shù)是1996年,，美國斯坦福大學(xué)John D. Altman博士等人開發(fā)出的MHC-抗原肽復(fù)合物四聚體（簡稱：MHC 四聚體）技術(shù),。由于TCR與MHC-抗原肽復(fù)合物之間的親和力低,，半衰期短，相互結(jié)合后容易快速脫落,，重組的可溶性MHC-抗原肽復(fù)合物單體并不適合用于抗原特異性的T細(xì)胞檢測,。

該技術(shù)由4個MHC-抗原肽單體分子及熒光染料組成的復(fù)合物，它以帶有信號標(biāo)記的鏈霉親合素為基礎(chǔ),，交聯(lián)四個MHC分子單體,，形成MHC四聚體；與其他應(yīng)用于T細(xì)胞檢測的傳統(tǒng)方法相比,，如酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(ELISPOT),、單細(xì)胞PCR等，MHC四聚體分析技術(shù)具有：

1）特異性高,；

2）穩(wěn)定性好,；

3）多樣化/個性化：可定制，合成特異的抗原多肽片段,，組合成各種 T 細(xì)胞選擇性MHC四聚體,；

4）定性/定量分析的優(yōu)勢

MHC-抗原肽復(fù)合物四聚體技術(shù)

但是MHC四聚體和ELISPOT技術(shù)存在一些局限：

1）可以使用的抗原肽數(shù)量非常有限，因而只能檢測幾種特定克隆的抗原特異性T細(xì)胞,；

2）可以檢測到的抗原特異性T細(xì)胞種類有限,，含量偏低；

3）所使用的抗原肽可能在檢測機(jī)體內(nèi)沒有相應(yīng)的抗原特異性T細(xì)胞,；

4）檢測的可能不是占主導(dǎo)地位的抗原特異性T細(xì)胞和含量最多的抗原特異性T細(xì)胞,；

5）檢測的抗原特異性T細(xì)胞不全面、不準(zhǔn)確,；

6）價格昂貴,；

7）四聚體技術(shù)只能檢測結(jié)構(gòu)上可以識別相應(yīng)多肽的T細(xì)胞，但是是否有殺傷功能無法確認(rèn),，因而不能進(jìn)行功能確認(rèn),。

Absin腫瘤抗原特異性T細(xì)胞含量檢測刺激試劑盒

本產(chǎn)品檢測納米顆粒負(fù)載癌細(xì)胞的全細(xì)胞抗原，抗原種類全面,、多樣和廣譜,，可全面準(zhǔn)確檢測不同組織中的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞。具有特異性高,，準(zhǔn)確性高,，所檢測腫瘤抗原特異性T細(xì)胞種類全面等優(yōu)點(diǎn)。測試的結(jié)果顯示使用負(fù)載B16F10腫瘤組織全細(xì)胞抗原的納米粒與小鼠脾細(xì)胞單細(xì)胞懸液共孵育激活腫瘤抗原特異性T細(xì)胞后,，在CD3+T細(xì)胞中可以表達(dá)IFN-γ的T細(xì)胞比例比負(fù)載8種B16F10的新抗原多肽的納米粒,、以及游離的B16F10腫瘤組織裂解液要多，也更全面,。

Absin腫瘤抗原特異性T細(xì)胞含量檢測刺激試劑盒測試結(jié)果快問快答：

1）該試劑盒中的納米粒是否會作為刺激物,，刺激樣本產(chǎn)生新的種類的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞,？

不會，腫瘤免疫循環(huán)一般只有在體內(nèi)才會完成

2）不使用二次激活物（多肽或者試劑盒中的納米粒）是否可以直接檢測樣本中的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞,？

不行,，或者效果很差，樣本不經(jīng)過二次激活所檢測的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞非常少或沒有,。

3）能否直接用腫瘤組織裂解液作為二次激活物,？

效果不好，從我們的驗(yàn)證數(shù)據(jù)中可以得到答案,。

4）我想要檢測的腫瘤類型或者物種沒有怎么辦,？

愛必信提供定制服務(wù)，除腫瘤外,，各種傳染病病原也可進(jìn)行磁珠包被,，但需要客戶提供抗原，詳情可點(diǎn)擊腫瘤/傳染病抗原特異性T細(xì)胞含量檢測刺激物定制查看,。

5）每種腫瘤都有不修飾、OVA修飾和fluc修飾三種盒子,，該如何選擇,？

與構(gòu)建腫瘤模型時是否修飾有關(guān)，建議相匹配,。

6）小鼠樣本建議是用什么組織樣本進(jìn)行測試,？

優(yōu)先推薦使用脾臟，血液中含量較少,，可能需要多個小鼠血液混合才能達(dá)到數(shù)量要求,。

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