日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

近年來，腫瘤免疫療法在癌癥治療中非?；馃?。腫瘤免疫學(xué)治療的目的是激發(fā)或調(diào)動機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力,，從而控制和殺傷腫瘤細(xì)胞,。隨著免疫治療的興起也推動了腫瘤研究的發(fā)展,，但是由于人源化體系的復(fù)雜性、免疫系統(tǒng)的部分或無效重組建等問題,，致使免疫腫瘤模型面臨著巨大的挑戰(zhàn),，臨床上迫切需要能夠用于個體化驗(yàn)證療效的體外模型。類器官的出現(xiàn)給腫瘤免疫治療提供了新的契機(jī),，然而,，現(xiàn)有的類器官中缺乏免疫細(xì)胞限制了其發(fā)展。

小愛這次給大家介紹一下基本的腫瘤類器官免疫共培養(yǎng)方法,，如下：

1,、類器官準(zhǔn)備

1）提前一周，復(fù)蘇培養(yǎng)類器官至狀態(tài)良好,；

2）取合適數(shù)量類器官,，使用預(yù)冷PBS清洗數(shù)次，去除大部分基質(zhì)膠,；

3）使用培養(yǎng)基重懸類器官,。

2、PBMC分離和類器官共培養(yǎng)

1）外周血在無菌環(huán)境下,，使用添加EDTA-K2的真空采血管采集,，運(yùn)輸保存；

2）將新鮮靜脈血與PBS緩沖液1：1稀釋,，輕輕混勻待用,；

3）添加4ml細(xì)胞分離液（abs930），緩慢加入靜脈血混合物8ml,，靜置待用,；

4）2000rpm離心20min，在此過程中升降速度降至1,，避免產(chǎn)生細(xì)胞融合,；

5）此時觀察到15ml離心管為4層，輕輕吸取第2層白色懸浮物于15ml離心管,，混勻待用,；

6）1500rpm離心10min，在此過程中升降速度降至1,，避免產(chǎn)生細(xì)胞融合,，棄上清；

7）添加適量T細(xì)胞無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基靜置培養(yǎng)觀察,。T細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的配置：向T細(xì)胞無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基里添加IL-2（abs05543）200-500單位/ml（刺激T細(xì)胞生長與增殖）,，CD3/CD28磁珠（abs160019）3ug/ml（激活T細(xì)胞）；

8）使用T細(xì)胞無血清培養(yǎng)基，懸浮調(diào)整至合適濃度,，96孔板,，每孔約加入5*10⁵ 活T細(xì)胞，100ul體積,；

9）重懸類器官混合液,，分別加入等量的樣至96孔板中，至總體積200ul,。

3,、培養(yǎng)觀察

1）D0觀察記錄類器官和T細(xì)胞狀態(tài)；

2）37℃,，5% CO₂條件下培養(yǎng),，每日連續(xù)觀察；

3）D3吸出100ul培養(yǎng)上清,，加入100ul新培養(yǎng)基,，同時加入（處理抗體或藥物）使至終濃度100nM（如果D3已出現(xiàn)顯著差別，則記錄大視野明場形態(tài),，終止實(shí)驗(yàn)）,；

4）觀察至實(shí)驗(yàn)組間差異顯著，拍照記錄大視野細(xì)胞明場形態(tài),；

5）細(xì)胞上清保存用于后續(xù)檢測,。

此圖為我司做得免疫共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，從上圖可明顯看出B藥物作用下,，T細(xì)胞有明顯的殺傷效果,。

今天講解就到這了，大家如有實(shí)驗(yàn)問題,，歡迎公眾號“愛必信生物"后臺留言哦,！

本期小愛產(chǎn)品推薦：

好消息,！Absin文獻(xiàn)獎勵重磅升級！

Absin特色產(chǎn)品線：

WB相關(guān)：ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker,、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒,、組化筆,；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑,；血清,、BSA、蛋白酶K、CTB,、TTX,、CEE；凋亡試劑盒,；呼吸爆發(fā)試劑盒,；ELISA試劑盒；重組蛋白,；抗體: 二抗,、標(biāo)簽抗體、對照抗體,；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...