牛垂體提取物(BPE)是由牛腦垂體制備的提取物,,有研究表明BPE具有明顯改善人垂體腺瘤細(xì)胞體外無(wú)血清培養(yǎng)條件的作用,對(duì)離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用。常用作無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,,可促進(jìn)上皮細(xì)胞,、內(nèi)皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞增殖,廣泛用作各種上皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞培養(yǎng)中的補(bǔ)充劑,。此外,,其具有抗氧化能力,可對(duì)抗過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死,,蛋白質(zhì)氧化,,膜破碎和DNA損傷。
BPE是無(wú)血清的促有絲分裂添加劑,,含有天然生長(zhǎng)因子的*混合物,,可與MCDB系列(MCDB170或MSDB154)或DMEM/Ham'sF12的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組合使用。
對(duì)于單層中上皮細(xì)胞的生長(zhǎng),推薦濃度為35?70ug/mlBPE,。通過(guò)使用優(yōu)化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基如MCDB170或MCDB154,,濃度可以降低。確定最佳BPE濃度的*方法是在選擇的細(xì)胞上進(jìn)行簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)測(cè)定,。建議將產(chǎn)品分裝成單次使用體積,,以避免反復(fù)凍融所引起的可能活性損失。
牛腦垂體提取物的提取方法,獲取新鮮牛腦垂體,去除組織表面血污及雜物,并剔除外部粘連組織及白色包膜,裸露整個(gè)垂體組織;向垂體組織中加入蛋白酶抑制劑,并破碎為糊狀,然后再加入蛋白提取液,在0~4℃低溫條件下依次經(jīng)過(guò)攪拌,離心,收集上清液;最后將上清液滅菌,即得所述牛腦垂體提取物,。采用本發(fā)明方法提取的牛腦垂體提取物中蛋白含量平均可達(dá)到15mg/ml以上,既可以用于細(xì)胞培養(yǎng),也可以用于組織工程培養(yǎng),。
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