產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒說明書

規(guī)格 : 50管/48樣,、100管/96樣

測試方法:微量法,、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6443

測定意義

TH位于線粒體的內(nèi)膜上,，又稱為線粒體復(fù)合體六,，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,，調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡,。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測定原理：

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化,。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH,，APADH在375nm有特征光吸收,，測定375nm光吸收的增加速率，來計(jì)算TH-2活性,。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì),、臺式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細(xì)閱讀購買說明,！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml,。

2）. 過濾混濁溶液,。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0,。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）,。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品,。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,，用水溶解提取,。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取,。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法,。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的,。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾,、鎳,、銅、銀,、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了,。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后),。

(6)分析成本低,、操作簡便、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻,，混勻時(shí)盡量避免起泡,。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí),，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。

2.        棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng),，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Sox2 Sox2 鼠單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser471) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑 100次

Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

phospho-DDX5 (Tyr593) 英文名稱： 磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體 0.1ml

Sox2 Sox2 鼠單抗 (FITC) Human

phospho-GSK-3 Beta(pSer9) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

S100A9 S100A9 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CREM (Ser271 +Ser 274) 磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

人細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium) 250ml 國產(chǎn)

ZBED3 英文名稱： 鋅指蛋白BED3抗體 0.2ml

Desmocollin 2 英文名稱： 橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體 0.1ml

S100A9 S100A9 鼠單抗 (PE) Human

SIPA1L2 英文名稱： 信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1樣蛋白2抗體 0.2ml

EPLIN 英文名稱： 惡性丟失蛋白EPLIN抗體 0.2ml

8-羥基脫氧鳥苷抗體 Anti-8-OHdG 0.1ml

Anti-WDR26/FITC 熒光素標(biāo)記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml

AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒說明書4-甲(>98%,BR)番瀉苷A蛋白樣品多粘菌素層析法去內(nèi)素試劑盒

對硝基芐(>98%,BR)番瀉苷B同位素[γ32P]ATP酶標(biāo)記GST融合蛋白篩選試劑盒

4-硝基溴化芐(>98%,BC)番瀉苷CGST釣餌（ PULL DOWN ）檢測試劑盒

4-硝基芐氯(>98%,BR)番瀉苷DHIS釣餌（ PULL DOWN ）檢測試劑盒

基-2-乙酰氨基-2-脫氧-b-D-葡萄糖苷(>99%,BC)紫草素GST融合蛋白陽性菌落鑒定試劑盒

4--Α-L-吡喃海藻糖苷(>98%,BC)川楝素GST融合蛋白陽性表達(dá)樹脂電泳篩選試劑盒

4-基-beta-D-葡萄糖酸苷(>98%,BC)川芎GST融合蛋白陽性表達(dá)點(diǎn)狀印跡篩選試劑盒

4-肼(>98%,BC)鹽酸川芎生物素釣餌（ PULL DOWN ）檢測試劑盒