產(chǎn)品名稱：小鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10277

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng),。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

IL-3(Human Interleukin 3) ELISA KIT 人白介素3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 UTS2R G蛋白偶聯(lián)受體14抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.1ml

RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人類風濕因子 96T

RIMS3 英文名稱： 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白3抗體 0.2ml

C20orf111 英文名稱： 誘導轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 0.2ml

 UTS2R G蛋白偶聯(lián)受體14抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

BNP(Human brain natriuretic peptide) ELISA Kit 人腦鈉素/腦鈉尿肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 VWCE VWCE抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MKK3/MK3 原活化蛋白激酶MKK3抗體 規(guī)格 0.1ml

CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶 96T

RRAD 英文名稱： RRAD抗體 0.2ml

CHD7 英文名稱： ATP依賴的解旋酶CHD7抗體 0.1ml

 VWCE VWCE抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Bov IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗IgG 0.1ml

phospho-GABRG2(Ser366) 英文名稱： 磷酸化γ基丁酸γ2受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh A1CF/Apo B RNA editing protein 載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

 MMP-26/FITC 熒光素標記基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PTPN4/MEG1 蛋白酪磷酸酶非受體型4抗體 規(guī)格 0.1ml

 TSHR(NT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基水樣品內(nèi)凝膠法定量檢測試劑盒20次乙酰膽堿酯酶

質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)凝膠法定量檢測試劑盒20次蔗糖磷酸化酶

樹脂法去內(nèi)試劑盒20次蛋白A

液相法去內(nèi)試劑盒20次頭孢菌素C鋅鹽

沉淀法去內(nèi)試劑盒20次鹽酸土霉素

蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒20次2′-脫氧尿苷-5′-單磷酸二鈉鹽

大量蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒5次2′-甲氧基尿苷

蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒20次無水氯化鈷

大量蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒5次聚乙二醇6000

蛋白樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20次乙二醇

蛋白樣品賴層析法去內(nèi)試劑盒20次1,，3-丁二醇

蛋白樣品多粘菌素層析法去內(nèi)試劑盒20次無水磷酸肌酸二鈉鹽

血清樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒20次無水偏釩酸鈉

血清樣品液相法去內(nèi)試劑盒20次偏重亞硫酸鈉

血清樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20次3-氨基乙酮

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。