產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10202

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

GIP ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Visfatin-2(CT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh GADD45GIP1 GADD45γ相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

visfatin ELISA Kit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 96T

Netrin G1 ligand 英文名稱(chēng)： 軸突生長(zhǎng)誘向因子G1配體抗體 0.2ml

Anillin 英文名稱(chēng)： 胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

 Visfatin-2(CT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Cytochrome-C 大鼠Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 beta endorphin β-內(nèi)啡肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Musashi 1/Msi1 神經(jīng)干細(xì)胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體 規(guī)格 0.2ml

PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)球蛋白 96T

SEC14 like protein 2 英文名稱(chēng)： SEC14樣蛋白2抗體 0.2ml

beta COP 英文名稱(chēng)： β衣被蛋白抗體 0.2ml

 beta endorphin β-內(nèi)啡肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml

phospho-GATA3 (Ser308) 英文名稱(chēng)： 磷酸化GATA結(jié)合蛋白3抗體 0.1ml

腺苷酸激酶-1  AK-1 0.1ml

 NCOA2/KAT13C /FITC 熒光素標(biāo)記核受體輔助激活蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Prostatic Acid Phosphatase 前列腺酸性磷酸酶抗體 規(guī)格 0.2ml

 CD14/Biotin 生物素化CD14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基酵母V型ATP酶（V type ATPase ）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次蒲公英

植物V型ATP酶（V type ATPase ）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次番石榴葉

動(dòng)物細(xì)胞線(xiàn)粒體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法20次紫檀香

定量檢測(cè)試劑盒2-乙酰

動(dòng)物組織線(xiàn)粒體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法20次右旋糖酐分子量D3

定量檢測(cè)試劑盒對(duì)羥基乙酰

植物葉綠體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法20次鹽酸丙咪嗪

定量檢測(cè)試劑盒胡椒乙

F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次多潘立酮

酵母F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次醋甲唑

A型ATP酶（A type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次異丁司特

動(dòng)物細(xì)胞總ATP酶（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次氯沙坦鉀

動(dòng)物組織總ATP酶（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次元胡LAMP鑒定試劑盒

總ATP酶（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次山慈菇LAMP鑒定試劑盒

酵母總ATP酶（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人異丙腎上腺素(iso-Hyd)Elisa測(cè)定試劑盒

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線(xiàn),，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。