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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-23 12:33:01瀏覽次數(shù):228次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號(hào) | YS-02X10269 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號(hào):YS-02X10269
細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;Glutamax(invitrogen 35050061),1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),,1%;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管,。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很?chē)?yán)格,,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,,放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管,。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,細(xì)胞凍存管用棉花包好,,4度2h,,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,,最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,,省了包棉花,、4度、-20度了,。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑:根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,加熱溶解,,補(bǔ)充水分,,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。
(四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),,殺菌效果好。
細(xì)胞特性:
1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng)。
NAIF1 protein/FITC 熒光素標(biāo)記核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
V5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記V5 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
alpha-2腎上腺素能受體抗體 ADRA2 1ml
Mouse Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
GLUT8 英文名稱(chēng): 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Proteasome 20S alpha 7 蛋白酶體PSMα7抗體 規(guī)格 0.2ml
V5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記V5 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白20Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MEP1A/Meprin alpha/PPHA 甲酸肽水解酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit 人半乳糖6酯酶 96T
RRM2 英文名稱(chēng): 核糖核苷酸還原酶亞基R2抗體 0.1ml
C1orf77 英文名稱(chēng): 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體 0.2ml
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.3ml
G Protein alpha Inhibitor 1 英文名稱(chēng): G蛋白α抑制蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh 5HTR2C 5-羥色胺受體2C抗體 規(guī)格 0.2ml
MPO /FITC 熒光素標(biāo)記髓過(guò)氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PTN/Pleiotrophin 多效生長(zhǎng)因子抗體 規(guī)格 0.1ml
TTF-2/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒家族受體α-4抗體流式組化
腸出血性大腸埃希菌(Enterohaemorrhagic E. coli)鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體流式組化
腸致病性大腸桿菌(Enteropathogenic E. coli)鑒定20次癌易感基因相關(guān)蛋白2
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒CD90抗體流式組化
腸集聚型大腸埃希菌(Enteroaggregative E. coli)鑒定20次L-谷二乙酯鹽酸鹽
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒D-半胱
腸侵襲性大腸桿菌(Enteroinvasive E. coli )鑒定20次牛血紅蛋白
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒γ-球蛋白(牛)
副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus)鑒定20次頭孢曲松鈉
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒環(huán)孢菌素A
霍亂弧菌(Vibrio cholerae)鑒定20次2′-脫氧肌苷
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒羥丙基-β-環(huán)糊精
耶爾森氏菌屬(Yersinia)鑒定20次羧甲基纖維素CM-32
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒甲脒瓊脂糖凝膠4FF
沙門(mén)氏菌(Salmonella)鑒定20次亞精
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