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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞培養(yǎng)基>> 小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-23 13:19:01瀏覽次數(shù):223次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10320 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10320
細胞生長實驗 :細胞生長良好,,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,,不規(guī)則細胞,,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),,細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,,剛剛發(fā)生細胞融合,,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,,我從10%-90%都用過,問題不大,,個人認為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,,凍存液可以在處理細胞前配置,,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管,。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,細胞凍存管用棉花包好,,4度2h,-20度2h或更長,,-80度過夜,,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
FFA ELISA Kit 大鼠游離脂肪酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Tumstatin 抑素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Gelsolin 凝溶膠蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT 小鼠酸脫氫酶E1 96T
Nociceptin 英文名稱: 孤肽/痛敏肽抗體 0.1ml
AP2 gamma 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 0.1ml
Tumstatin 抑素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Polyprotein (Hepatitis G Virus) 庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MGMT O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格 0.2ml
PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白酪酸激酶 96T
RNF75 英文名稱: 環(huán)指蛋白75抗體 0.2ml
CEP27 英文名稱: 中心體蛋白27抗體 0.1ml
Polyprotein (Hepatitis G Virus) 庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Avidin/Cy5 Cy5標記的兔抗親和素 0.1ml
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 英文名稱: 磷酸化葡萄糖合成酶1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ABL2 ABL2蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MITF/FITC 熒光素標記小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml
TRA16/FITC 熒光素標記受體相關(guān)蛋白16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基麥芽β-葡聚糖酶比色法定量檢測試劑盒20次D-環(huán)絲
大麥β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次BOC-甘
麥芽β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次N-乙酰-L-蛋
麥芽汁β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次α-半乳糖苷酶
啤酒糟β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次風(fēng)味酶
燕麥β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次羧肽酶Y(酵母)
酵母β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次多酚氧化酶(菌菇)
蘑菇β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次5-溴尿苷
大麥β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次花寶1號
麥芽β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次庚烷磺酸鈉
麥芽汁β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次雷公藤酯甲
啤酒糟β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次沙苑子苷A
燕麥β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次DL-甘
酵母β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次磷脂酰絲
蘑菇β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次T7 DNA聚合酶
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,,加熱溶解,,補充水分,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高,。因此,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好,。
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