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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞培養(yǎng)基>> 大鼠骨骼肌細胞*培養(yǎng)基
參 考 價 | 面議 |
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所 在 地上海市
更新時間:2022-03-23 09:45:09瀏覽次數(shù):239次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10193 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:大鼠骨骼肌細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10193
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,,細胞密度適合,,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,,而且消化時不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,,我從10%-90%都用過,問題不大,,個人認為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,,凍存液可以在處理細胞前配置,,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管,。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,,細胞凍存管用棉花包好,,4度2h,-20度2h或更長,,-80度過夜,,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,,加熱溶解,,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高。因此,,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,,殺菌效果好,。
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,,貼壁培養(yǎng),。
NF-M/FITC 熒光素標記中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標記VSV-G tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
P53凋亡刺激蛋白2 ASPP2 0.1ml
Goat human IgM/Cy7 Cy7標記的羊抗人IgM 0.1ml
GPCR EX33 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體EX33蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRDX2/Peroxiredoxin-SO3 硫氧還蛋白過氧化物酶2 規(guī)格 0.2ml
VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標記VSV-G tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TRANCE(Human TNF related activation induced cytokine) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)激活誘導因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgM 小鼠抗人IgM 規(guī)格 1mg
PG(Human peptidoglycan) ELISA Kit 人肽聚糖 96T
Senataxin 英文名稱: 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
CD62L 英文名稱: L選擇素抗體 0.1ml
GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GCP3 英文名稱: γ-微管蛋白復合物GCP3抗體 0.2ml
血管緊張素II抗體 Ang-Ⅱ 0.1ml
NDRG4/FITC 熒光素標記抑癌基因NDRG4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Profilin 1 前纖維蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
VEGF-D/FIGF/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠血管內(nèi)皮生長因子D型VEGFD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠骨骼肌細胞*培養(yǎng)基細胞鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次地黃探針法PCR鑒定試劑盒
組織鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次小鼠白介素18(IL-18)Elisa測定試劑盒
植物鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次人血紅蛋白C(HbC)Elisa測定試劑盒
鈣調(diào)蛋白結(jié)合檢測試劑盒篩選5次小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)Elisa測定試劑盒
細胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性比色法定量檢測試劑盒20次大鼠尿酶型纖溶酶原活物受體(PLAUR/uPAR)Elisa測定試劑盒
組織蛋白磷酸酶1(PP1)活性比色法定量檢測試劑盒20次豬促甲狀腺素釋放素(TRH)Elisa測定試劑盒
細胞絡(luò)磷酸酶(TP)活性比色法定量檢測試劑盒20次兔脂蛋白α(Lp-α)Elisa測定試劑盒
組織絡(luò)磷酸酶(TP)活性比色法定量檢測試劑盒20次β分泌酶抗體流式組化
細胞絡(luò)磷酸酶(TP)活性熒光定量檢測試劑盒20次周期素依賴性酶8抗體流式組化Anti-CDK8
組織絡(luò)磷酸酶(TP)活性熒光定量檢測試劑盒20次外胚層發(fā)育抗體流式組化
細胞酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次人類狀瘤病抗體流式組化
組織酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次胰島素受體-α抗體流式組化
體液酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次雙微體2癌基因抗體流式組化
植物酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次血小板源性生長因子-BB抗體流式組化
/酵母酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次菠蘿蛋白酶
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