產(chǎn)品名稱：大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10161

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。
PI3K ELISA Kit 大鼠磷酸肌醇3激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 WNT10A 信號(hào)通路WNT10A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Gab1 接頭蛋白Gab 1抗體 規(guī)格 0.1ml

GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 96T

phospho-NUDC(Ser326) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體 0.1ml

Argonaute 4 英文名稱： 真核翻譯起始因子2C4抗體 0.2ml

 WNT10A 信號(hào)通路WNT10A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IL-12 小鼠白介素-12Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 phospho-MK1/MAPKK1(Ser298) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MTMR8 肌管素相關(guān)蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml

F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 人凝血因子Ⅻ 96T

Sialoadhesin 英文名稱： 唾液酸結(jié)合性球蛋白樣凝集素1抗體 0.2ml

C6orf226 英文名稱： 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框226抗體 0.2ml

 phospho-MK1/MAPKK1(Ser298) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

GPR176 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體 0.2ml

活化復(fù)制因子1抗體  ATF1 0.1ml

 NFKBp65/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRDM1/Blimp1 B細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

 VWCE/URG11/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-10）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次P53凋亡蛋白2

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-10）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次凋亡抑制因子5抗體流式組化

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-10）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次雌素受體α/β抗體流式組化

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人類皰疹病4抗體流式組化

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次白介素-23抗體流式組化

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體流式組化

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體流式組化

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次DL-半胱

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次L-谷單鈉鹽

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次心肌黃酶

（10樣本）牛血纖維蛋白原

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次哌拉西林

（10樣本）甲硝唑

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次嘌呤

（10樣本）氨基蝶呤