產(chǎn)品名稱：滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10067

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
Tie1/FITC 熒光素標(biāo)記血管生成素-1受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ATM(ataxia telangiectasia mutated) 擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

抗spindly抗體  SPY 0.1ml

SCN11A 英文名稱： 鈉通道蛋白11α抗體 0.2ml

EGFP 英文名稱： 重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4(Ser1073) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml

ATM(ataxia telangiectasia mutated) 擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Collagen I 小鼠I型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 DUSP1/MKP-1 原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MTBP/MDM2BP 雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

TPS(Human Total protein S) ELISA Kit 人總蛋白S 96T

SOX30 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子SOX30抗體 0.1ml

CD14 英文名稱： 內(nèi)受體抗體 0.1ml

 DUSP1/MKP-1 原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

Factor XI light chain 英文名稱： 凝血因子11輕鏈抗體 0.2ml

CD45抗體  CD45 0.1ml

 Ntn1/FITC 熒光素標(biāo)記軸突導(dǎo)向因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLEKHM1 石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體 規(guī)格 0.2ml

Goat  human IgA/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基直腸腫瘤標(biāo)記波形纖維蛋白糞便檢測(cè)試劑盒50次乙酰A

直腸腫瘤標(biāo)記K－ras糞便檢測(cè)突變巢式分析試劑盒50次皮粉（含鉻）

直腸腫瘤標(biāo)記K－ras糞便檢測(cè)突變熒光分析試劑盒50次人白介素2可溶性受體α鏈（IL-2sRα/CD25）ELISA試劑盒,

醫(yī)學(xué)酶類分析試劑專題人癌易感蛋白2（BRCA-2）ELISA試劑盒,BRCA-2 ELISA kit

名稱規(guī)格人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3（AFP-L3）ELISA試劑盒,AFP-L3 ELIS

腺苷脫氨酶（ADA）定量檢測(cè)試劑盒20次人P53（P53）ELISA試劑盒,P53 ELISA kit

腺苷脫氨酶（ADA）定量檢測(cè)試劑盒20次人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰酶抗體IgA（tTG-IgA）ELISA試劑盒,tTG-IgA ELISA ki

腺苷脫氨酶（ADA）定量檢測(cè)試劑盒20次人抗膜DNA抗體（cmDNA）ELISA試劑盒,cmDNA ELISA kit

酵母腺苷脫氨酶（ADA）定量檢測(cè)試劑盒20次人抗染色體抗體（anti-chromosome Ab）ELISA試劑盒, anti-chromos

細(xì)胞5’－核苷酸酶（5’－NT）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人抗硬皮病抗體70（SCL70/topoⅠ）ELISA試劑盒,SCL70/topoⅠ ELISA

組織5’－核苷酸酶（5’－NT）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人白喉抗體（Diphtheria Ab）ELISA試劑盒,Diphtheria Ab ELISA

血液5’－核苷酸酶（5’－NT）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）ELISA試劑盒,CGRP ELISA

細(xì)胞α-L-巖藻糖苷酶（AFU）比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人游離睪酮（F-TESTO）ELISA試劑盒,F-TESTO ELISA

組織α-L-巖藻糖苷酶（AFU）比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人3-硝基酪（3-NT）ELISA試劑盒,3-NT ELISA

血液α-L-巖藻糖苷酶（AFU）比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人骨成型蛋白4（BMP-4）ELISA試劑盒,BMP-4 ELISA